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    生物超弱发光在法医学中的研究应用展望 能发光的生物

    时间:2020-02-20 10:29:40 来源:柠檬阅读网 本文已影响 柠檬阅读网手机站

    【摘 要】 生物超弱发光携带着生物体新陈代谢和能量转化的信息,已成为生命学科的重要研究领域。本文回顾生
    物超弱发光的研究历史、特点及在医学领域的研究应用现状,展望生物超弱发光在法医学,尤其是死亡时间推测和损伤方
    面的研究应用前景。
    【关键词】生物超弱发光;
    法医学;
    死亡时间;
    损伤
    【中图分类号】R919
    【文献标识码】B
    【文章编号】1007—9297(2005)01—0051-03
    The appficafion prospect of the USE of bio-photon emission in forensic science. ZHU Xin ju. WANG Zhen-yu.o~, YU
    0 un,et a1.Department ofForensic medwine,Xi ∞Jiootong university,Xi ∞ 710061
    【Abstract】 Because of the bio—photon emission (BPE)from biological system carries the important information of
    metabolism and energy transformation of the living biological system including human, so that BPE s research will become an
    important research field in life science.This paper reviewed BPE s research history,characters and advances in medical field,
    and presented the initial prospect of future use in forensic science esp.in postmortem interval and injury.
    【Key words】Bio-photon emission;
    Forensic science;
    Postmortem interval;
    Injury
    生物超弱发光(Bio—photon Emission or Ultra—
    weak Bioluminescence,BPE)是生物体进行新陈代谢
    过程中细胞自发辐射极微弱的光子流,以及细胞受外
    界激发光消失后仍保持的极其微弱的延迟发光.其强
    度仅为100~104光子/(cm2(s)。[11 BPE广泛存在于动
    物、植物以及单细胞生物之中.是反映生物体本原的
    与生命活动过程有关的信息。用灵敏的现代光子计数
    技术对BPE进行初步研究表明,动植物的不同生理
    活动过程,存在不同强度和特征的超弱发光 超弱发
    光与生物体的许多重要生命过程,如氧化代谢、信息
    传递、细胞分裂、光合作用和癌变、死亡及生长调控等
    存在着内在联系,已成为生物光子学的重要研究方向
    之一,[21在临床诊断、农作物遗传性诊断及环境检测
    等领域可有重要的应用。本文回顾BPE的研究历史、
    特点及在医学领域的研究应用现状,从法医学角度展
    望生物超弱发光在本学科的研究、应用前景。

    、BPE的发现和研究历史
    生物超弱发光的发现,可追溯到上个世纪20年
    代。早在1923年,前苏联科学家G.Gurwitsh在著名的
    “洋葱试验”中就已发现并证明了超弱发光现象。[31到
    了60年代,前苏联科学家对超弱发光进行了大量研
    究,Mamedov对90余种生物的测定发现.除蓝藻和原
    生动物外,所有生物都有不同程度的发光.证明了超
    弱发光的普遍性。[4/Slawinska等更进一步提出任何生
    命物质都存在着超弱发光现象。『5】80年代以后,BPE
    的研究已在前苏联、美国、13本、欧洲以及我国展开.
    并已开始向细胞、亚细胞及分子水平深入。到目前为
    止,人们已经对超弱发光的机制、测试仪器及其应用
    开展了大量研究工作
    二、BPE的特点
    BPE极其微弱,[61生物系统表面每平方厘米/秒
    (om ·s一1)发射的光子可以从几个到几百个,这一强
    度相当于远在10公里甚至100公里外一根蜡烛发出
    的光。分裂的细胞比休止的细胞发光强,并主要在细
    胞分裂前期发射,所以称有丝分裂发光。发射光谱很
    宽,至少覆盖从紫外到红外的整个光谱区。BPE的值
    和生物进化程度成正比,进化程度越高,其BPE值越
    大,辐射的波长越向红外扩展。发光强度与生物系统
    的生理和生物学功能有多方面的联系:超弱发光强度
    与细胞的种类及其所处的代谢状态有关,如正常细胞
    【作者简介】朱新菊(1979一),女,江苏人,在读法医学硕士,主要从事法医病理学研究。
    Tel+86—29—82655472.E-mail:wzy21 8@mail.xjtu.edu.cFi
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    的延迟发光强度随细胞浓度的增加而减小.而肿瘤细
    胞则相反.肿瘤生长旺盛期大鼠血清的超弱发光与对
    照鼠的相比偏差最大:对各种物理和化学因素很敏
    感,几乎任何一种化学物质都能影响细胞发光的强
    度。
    三、BPE的来源和可能机制
    生物体在进行生理、生化反应的过程中,处于基
    态的原子或原子团获得能量.其电子从基态跃迁到激
    发态,处于激发态的原子或原子团不稳定,将释放多
    余的能量回到基态,能量的释放伴随有热、电离和光
    子的发射等,其中能量以光子形式释放的过程称为生
    物的超弱发光。
    代谢和核酸合成是生物超弱发光的两大主要来
    源,萌发绿豆中这两者之和约为96%。吲代谢发光又
    主要来源于氧化还原等代谢过程,如脂肪酸氧化、酚
    和醛的氧化、H 0 的酶解、花生四烯酸的氧化、儿茶酚
    胺和单宁的过氧化,醌的氧化裂解、蛋白质和氨基酸
    的氧化等。氧化剂D 0明显增强血红素蛋白的发光强
    度、呼吸抑制剂NaN,对萌发绿豆超弱发光的抑制达
    72%等都是极好的例证。[71Wright JR等通过小鼠肝脏
    微粒体的化学发光与脂类过氧化的研究,证明脂肪酸
    氧化是超弱发光的主要来源之一。[81代谢发光机制包
    括了活性氧生成与控制两个方面,能较好地解释自由
    基引起超弱发光的可能性。由于活体内的氧化反应速
    率受抑制剂的控制,如生育酚、过氧化物酶、过氧化物
    歧化酶、维生素A、维生素C等都能清除活性自由基.
    因此,生物在代谢过程中产生的大量自由基不可能使
    超弱发光强度太高.但是当生物体内的天然阻氧化剂
    和氧化脂类之间的平衡被打破后.将导致发光强度瞬
    时剧增,出现“闪光现象”。
    核酸DNA和RNA 的合成反应是超弱发光的另
    一个来源.它在绿豆种胚超弱发光中约占24%,其波
    长在190~325 nm的紫外波段.[21与代谢发光的光谱范
    围有所不同,用代谢发光难以解释。因此,分裂发光与
    代谢发光可能有不同的来源和机制,Popp等提出过
    DNA光子贮存假说和分化的物理模型。[91 Rattemeyer
    等根据溴化乙锭对超弱发光的影响.也初步证明了
    DNA是一个超弱发光源。[101马文建等还对DNA发光
    特异性进行了研究,结果表明在所有碱基中只有鸟嘌
    呤能够发光,且发光强度与浓度(亦即DNA浓度)成正
    相线性关系。lI】】
    四、BPE在医学领域的研究现状及应用前景
    尽管生物超弱发光的机制研究还有待深入.但超
    弱发光研究所揭示的生命科学命题.已经展示了光辉
    法律与医学杂志2005年第12卷(第1期)
    的前景。近年来,光子学技术在生物特性研究中的作
    用越来越突出.已成为一类新的生命科学的研究工
    具。这种研究方法可能成为研究细胞信息传递、调控、
    分化、识别等基本过程的重要工具.进而发展人为调
    节超弱发光来实现对生命过程的控制。[11目前在医
    学、药理学、农业、环境科学及食品科学等方面,对
    BPE均有深入的探索。
    对临床实践来说,血清的超弱发光较为重要。血
    液的超弱发光可以作为一种灵敏、快速简易的生物物
    理指标,对血液发出的生物光子进行测量和分析可以
    揭示疾病的发生或者提供先兆。罗金梅报道了人体体
    表的生物发光随年龄的增加而增加,而且吸烟人的生
    物发光普遍高于同龄正常组。[11马玉琴等发现癌症患
    者血液的发光强度明显高于对照组,且有显著性差
    异,通过对人体血液的超弱发光测量,可以进行癌症
    患者的早期诊断。

    超弱发光对于鉴别肿瘤和炎症也
    是极其有用的指标。顾樵曾报道利用生物光子鉴别肿
    瘤和炎症,鉴别率达100%。超弱发光与许多生理生化
    反应有关。对绵羊精子的研究发现,发光强度与活力、
    呼吸、果糖酵解、磷酸肌酸呈正相关,这种发光与活力
    和能量代谢间的内在联系,反映了精子能量转化过
    程,是评价精液品质很有价值的指标。[131此外.超弱发
    光还可以用于检测病人对药物过敏的情况 在患者血
    清中加入待检药剂,观察其发光变化。与健康人相比,
    耐药病人的发光值高2~3倍.对药物敏感的病人发光
    值高6~8倍。
    生物医学光子学被预测将在以下8个领域有所
    发展:光动力学医疗、激光和组织的相互作用、无透镜
    显微术、在血液化学分析中的进展、癌症的光学显示、
    利用激光检测DNA、伤害最小的光子设备、一体化的
    激光和成像系统。lI4】
    五、BPE在法医学的应用研究展望
    (一)BPE运用于死亡时间推测
    目前死亡时间的估计.尤其是早期死亡时间的估
    计尚无精确可靠的方法。生命的终结是一个逐渐发展
    的过程,从生到死没有一个截然的分界线。通常死亡
    是指个体生命的终结而言。从生物学角度来说.机体
    内各种组织、细胞并非在同一时间进入死亡。临床死
    亡发生后,由于机体各种组织对缺氧的耐受性不一.
    故心跳停止后.各种组织细胞也会经历一段长短不一
    的缺氧期.逐渐发生各种缺氧性改变,最终发展至生
    物学死亡(也称细胞性死亡)。在这个阶段.细胞内的
    “自由基”复合反应以及DNA的构象必然会随死亡时
    间的延长发生一系列的变化,因此超弱发光也必然会
    法律与医学杂志2005年第12卷(第1期)
    随之产生一系列变化。此时利用生物光电技术定时测
    量细胞辐射出的生物光子数,就可以得到生物光子与
    死亡时间的关系。研究发现,离体的不同发育时期的
    鸡胚神经细胞发光有很大差异,9天以后的鸡胚神经
    细胞有明显的特征曲线。该曲线的产生与外界温度、
    氧、电场作用和光照等因子有关。温度由41 降到
    37 过程中,发光强度亦降低,同时最大峰位置后移,
    但当温度低于37 时。则特征曲线变得不明显;
    外界
    电场和光照能使发光迅速增加,但不能改变发光曲线
    的特征.且移去外电场后,能迅速恢复到原发光水平。
    『l5】既然发育时期的BPE可出现特征曲线。是否死亡时
    BPE也会出现特征曲线,这有待于开展进一步研究。
    (二)推断损伤时间、形状、程度和伤口愈合时间
    机体受损后.组织细胞的生理活动和形态功能发
    生不同程度的改变。故其超弱发光的强度和特征也会
    随之出现不同程度的改变。Balasigamani等在鼠背部
    损伤BPE测量的实验中发现。损伤后即刻获得的生
    物光子的二维图像。未显示明显的伤口形态和定位;

    损伤48 h后。显示出伤口形态,且光子密度持续上
    升;
    随着免疫系统的激活。光子密度在伤后3—5 d达
    峰值;
    伤后第6天,光子密度开始衰减;
    在伤后第8天
    伤口完全愈合。图像不再显示明显的伤口形态;
    痂脱
    落后光子密度又恢复到正常状态。【1句研究损伤后BPE
    的强度、特征、分布随损伤时间的变化规律,有利于更
    加精确的推断损伤时间、损伤程度等,同时也能在一
    定程度上反映损伤性质以及致伤工具的特征。
    (三)BPE应用于法医学的可行性
    顾樵对鱼肉的新鲜度与光电强度进行了深入的
    研究.建立了鱼肉的新鲜度与光电强度递减的方程
    式。

    由于生物超弱发光辐射出的光子呈量子状态,
    运用该法对人尸体进行研究.可以精确计数。较之以
    往根据尸温测量、DNA降解程度的图像分析等方法
    具有极大的优越性。因此可用来对死亡时间等进行前
    所未有的精确推断。由于肌细胞耐缺氧能力强,在躯
    体死亡后.肌细胞的存活时间较其他组织要长,故其生
    物发光的能力也较其他组织要强,易于测定。目前,已
    有商品化的生物光子测定仪面世,运用该仪器进行动
    物试验测定动物死后肌肉的BPE变化。在人尸体上取
    心肌和骨骼肌重复动物实验过程。校正动物试验数据。
    建立人体死亡时间与肌肉组织生物光子变化的方程
    式.从而根据方程式及测定的BPE值来推断死亡时
    间。
    · 53 ·
    此外,生物光子学的其他研究成果也可借鉴运用
    到法医学中。如无透镜显微术等可作为继电镜之后的
    又一法医病理学研究的重要手段;
    利用激光检测微量
    检材中的DNA,在法医物证鉴定中具有重要意义:一
    体化的激光和成像系统将成为继CT、MRI之后的新
    型检测装置.在法医临床的损伤鉴定中发挥重要作
    用。环境监测中运用生物发光技术对废水、废液中重
    金属及致病菌进行检测。灵敏度可达十亿分之几的数
    量级,显然,这些技术对法医毒物分析的发展也将产
    生巨大的推动作用。
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