CK19及Galectin-3在甲状腺乳头状癌合并桥本氏甲状腺炎的表达及临床意义
时间：2023-01-15 15:45:04 来源：柠檬阅读网 本文已影响 人 
高 丹 吴 影 付雪莲 李淑莲 李化敏 董祥梅 付 瑶
（牡丹江医学院附属红旗医院病理诊断中心，黑龙江 牡丹江， 157000）
近年来甲状腺癌发病率明显上升，且女性发病率明显高于男性[1]。临床病理将甲状腺癌主要分为甲状腺髓样癌、滤泡状甲状腺癌、甲状腺乳头状癌和未分化甲状腺癌。甲状腺乳头状癌（PCT）是最常见的一种甲状腺癌类型，占80%左右，多表现为甲状腺肿块与淋巴结肿大，多在体检过程中发现[2]。PCT的恶性程度在所有甲状腺癌病理分型中最轻微，而且一般患者病程进展缓慢，预后相对良好。桥本甲状腺炎（HT）属于自身免疫性疾病的一种，患者伴随典型的甲状腺分泌过多，属于临床常见病与多发病。HT多发病缓慢，但是患者病程较长，容易反复发作。随着临床上对甲状腺乳头状癌和桥本甲状腺炎研究进展加深，许多学者认为，HT可以演变成PCT，且临床上两者共同发病的情况比较多见[3]。随着临床医学发展，虽然多数甲状腺乳头状癌能够在超声下观察其良恶性病变程度，但是仍然需要病理组织检验作为诊断的金标准[4]。在病理诊断中，由于甲状腺乳头状癌合并桥本氏甲状腺炎（PCT-HT）的特殊性，单纯依照形态学诊断较为困难。随着生物分子学研究进展加深，多数学者认为[5-6]，应用医学分子标记物能够有助于诊断PCT-HT。因此，本研究分析细胞角蛋白19（cytokeratin 19，CK19）及半乳糖凝集素-3（Gralection-3）在PCT-HT的表达及临床意义，具体报道如下。
1.1 一般资料
选取2017年8月～2021年8月牡丹江医学院附属红旗医院收治的100例PCT-HT患者作为观察组，另选取同期来牡丹江医学院附属红旗医院治疗的100例单纯甲状腺乳头状癌患者作为对照组，进行回顾性分析。对照组患者中，男33例，女67例；
年龄38～62岁，平均年龄（51.30±3.57）岁；
病程1～3年，平均病程（2.03±0.24）年。观察组患者中，男46例，女54例；
年龄37～66岁，平均年龄（51.29±3.42）岁；
病程为1～3年，平均病程（2.25±0.35）年。两组患者一般资料对比，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。所有患者对本研究知情并签署同意书。本研究经牡丹江医学院附属红旗医院医学伦理委员会批准。
1.2 纳入与排除标准
纳入标准：所有患者均经病理诊断确诊为甲状腺癌，且病理分类为乳头状癌[7]；
抗甲状腺球蛋白抗体、抗甲状腺过氧化物酶自身抗体、抗甲状腺微粒体抗体等指标异常；
年龄≥18岁；
临床资料完整。
排除标准：病情不稳定，存活期＜3个月；
在研究前有放射线接触史者；
合并自身免疫缺陷类疾病者；
合并甲状腺功能亢进者；
合并其他恶性肿瘤者；
合并慢性感染类疾病者；
合并精神类疾病者。
1.3 方法
一般资料收集：选取牡丹江医学院附属红旗医院2017年8月～2021年8月收治的100例PCT-HT患者及100例单纯甲状腺乳头状癌患者进行回顾性分析，收集所有患者一般临床资料，其中包括患者的性别、病程、年龄、肿瘤直径、淋巴结转移情况、肿瘤侵犯性（甲状腺腺外侵袭、包膜侵袭性或无侵袭）、临床分期等。
CK19及Galectin-3表达检测：应用免疫组化法检测CK19及Galectin-3表达。具体方法为：所有标本均采取石蜡进行常规包埋，并进行连续切片，厚度为4 μm，在60 ℃下烘烤90 min。随后应用EnVision法进行实验，实验依照试剂盒说明书进行，取2 mL肝素进行抗凝血处理，随后加入磷酸缓冲盐溶液（PBS）进行稀释，直到液体为4 mL位置，随后加入淋巴分离液2 mL，以2 000 r/min的速度进行20 min离心后吸取单个细胞核。并注意需要在PBS洗涤之后将细胞与抗体异硫氰酸荧光素进行孵育30 min，再次应用PBS洗涤放置到PBS悬浮液之中，应用流式细胞仪观测其实际情况，应用PBS代替检测过程中的一抗作为主要的阴性对照分析样本，并应用已知患者的阳性甲状腺组织作为免疫组化的阳性对照组织，从而分析不同组织中CK19及Galectin-3的表达水平。应用显微镜观察所有受检患者甲状腺组织的实际切片染色情况，将显微镜视野调整为400倍后进行观察，并依照组织所表现的染色强度和染色细胞比例对CK19及Galectin-3的表达水平进行综合评价。其中，无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。并在显微镜下观察甲状腺组织切片染色情况，以400倍视野，根据染色强度和染色阳性细胞进行综合评分。染色强度评分：棕褐色为3分，棕黄色为2分。染色阳性细胞数＞75%为5分，50%～75%为5分，25%～50%为2分，5%～25%为1分，＜5%为0分。最终，根据患者甲状腺组织的细胞数量和染色实际强度来判断CK19及Galectin-3表达是否为阳性。0～1分为阴性（-），2～4分为弱阳性（+），5～8分为阳性（++），9～12分为强阳性（+++）[8]。弱阳性（+）、阳性（++）、强阳性（+++）均为阳性。
1.4 统计学分析
采用SPSS 23.0统计学软件进行数据分析，计数资料以[n（%）]表示，组间比较行χ2检验；
计量资料以（±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析；
采用Spearman相关分析方法分析CK19及Galectin-3与PCT-HT的相关性；
应用ROC曲线评价CK19及Galectin-3对PCT-HT诊断的价值；
采用Logistic回归分析分析上述指标对患者的独立预测价值；
用ImageProPlus软件分析免疫组化结果。以P＜0.05为差异有统计学意义。
2.1 两组患者临床特征与CK19及Galectin-3表达水平对比
两组患者性别、年龄、肿瘤直径、淋巴结转移情况对比，差异无统计学意义（P＞0.05），两组患者肿瘤侵犯性、临床分期、CK19与Galectin-3表达情况对比，差异有统计学意义（P＜0.05），观察组肿瘤侵犯性为无的占比明显低于对照组，临床分期I～II的占比明显低于对照组，CK19与Galectin-3阳性占比明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。HE和SP法染色显示，两组CK19与Galectin-3表达均为阳性，对照组表达稍微高一些。见图1。
图1 两组HE染色及免疫组织化学染色结果
表1 两组患者临床特征与CK19及Galectin-3表达水平对比（[-x±s）/n（%）]
2.2 CK19及Galectin-3与PCT-HT的相关性
Spearman相 关 分 析 结 果 显 示CK19及Galectin-3与PCT-HT呈正相关（r=0.423、0.539，P＜0.05）。见表2。
表2 CK19及Galectin-3与PCT-HT的相关性
2.3 CK19及Galectin-3对PCT-HT的诊断价值
CK19诊断PCT-HT价值曲线下面积为89.63，最佳诊断着色界限值为75.73%，Galectin-3的曲线下面积为78.89，最佳色界限值为82.53%。logistic回归分析结果表明CK19及Galectin-3对PCT-HT具有独立预测价值（P＜0.05）。见图2、表3。
图2 CK19及Galectin-3对PCT-HT的ROC曲线图
表3 CK19及Galectin-3对PCT-HT的诊断价值
近年来研究发现[9-10]，PCT与HT存在着密切关系，PCTHT发病率呈上升趋势，HT罹患甲状腺癌的概率较正常人增加2倍，并且合并HT的患者较未合并者发病风险增高。PCT的癌细胞一般呈现出滤泡状或乳头状排列状态，并且乳头的轴心会出现淋巴细胞浸润现象，而且癌细胞和病变的HT组织相互混合在一起，癌细胞以点状的散播样式分布在甲状腺组织和HT组织中。HT发病后患者的甲状腺组织呈肿大状态，且对称分布，被膜表面比较光滑，轻微增厚，质地韧性较大，与周围组织无粘连现象。有学者认为[11]，HT的发生会促使甲状腺乳头状癌发展，也是癌前病变的一种，CK19出现异常高表达或BRAF突变可能对于HT癌变产生一定作用。另外有研究认为[12]，甲状腺乳头状癌诱导的癌周淋巴细胞浸润可能诱导HT的发生。因此，应用有效的分子生物学法辅助诊断PCT-HT具有重要价值。CK19属于低分子量细胞角蛋白，在各种肿瘤和上皮组织中呈现高表达状态。有研究发现[13]，CK19在甲状腺乳头状癌中呈现弥漫高表达现象。Galectin-3属于β-半乳糖苷与蛋白动物凝集素结合的家族成员之一。研究发现[14-15]，Galectin-3在胃癌、乳腺癌、喉癌、膀胱癌、甲状腺乳头状癌等癌症均存在高表达。因此，本研究对CK19、Galectin-3在PCT-HT的表达和临床意义展开分析，希望能够为PCT-HT的诊断提供参考价值。
本研究结果表明，两组患者肿瘤侵犯性、临床分期、CK19与Galectin-3表达情况对比差异显著，观察组肿瘤侵犯性为无的占比明显低于对照组，临床分期I～II的占比明显低于对照组，CK19与Galectin-3阳性占比明显高于对照组。由此证明，PCT-HT患者的肿瘤侵犯程度较为严重，且CK19与Galectin-3表达水平更高。这可能是因为，HT会通过滤泡上皮细胞过度增生，逐渐转变为非典型增生，最终发展为PCT。不过，与以往的研究有出入，可能与样本量的差异性有关。另外，在PCT中Galectin-3和CK19的表达意义已从大量研究中得以印证，两者联合应用可提高PCT临床诊断的敏感度；
但这两种抗体在桥本氏甲状腺炎合并有甲状腺乳头状癌（PCT）核样不典型细胞的情况时，同样呈阳性表达，这使得两者在临床工作中更加难以诊断。本研究显示PCT-HT的发生与滤泡上皮细胞非典型增生具有明显相关性，也可能是PCT的早期事件[16]；
Spearman相关分析结果显示CK19及Galectin-3与PCT-HT呈正相关（r=0.423、0.539，P＜0.05）。由此证明，PCT-HT患者组织内CK19及Galectin-3呈现更高的表达状态。这可能是因为，Galectin-3能够调节细胞分化与生长，抑制肿瘤细胞凋亡，促进血管生成，进而促进肿瘤细胞转移和侵袭等[17]。研究发现[18-19]，CK-19在PCT总的诊断敏感度较高，对于甲状腺肿瘤的诊断准确率为22.6%，结节性甲状腺肿瘤为21.1%，HT为33.3%，PCT为98.5%。因此，CK19与PCT-HT的相关性更高；
CK19诊断PCT-HT价值曲线下面积为89.63，最佳诊断着色界限值为75.73%，Galectin-3的曲线下面积为78.89，最佳色界限值为82.53%。由此证明，CK19与Galectin-3在PCT-HT患者中具有较高的诊断价值。黄力营等[20]研究发现，Galectin-3和CK19在诊断甲状腺乳头状微小癌和非典型滤泡上皮增生中具有重要价值，诊断准确率较高，与本研究结果相似。
综上所述，PCT-HT患者肿瘤侵犯性、临床分期较高，CK19与Galectin-3阳性表达占比较高，并且CK19免疫组化着色面积＞75.73%，Galectin-3＞82.53%是PCT-HT的相关危险因素。
猜你喜欢 乳头状甲状腺癌染色 无限路及其笛卡尔积、直积的孪生α-距离边染色西北民族大学学报（自然科学版）(2022年2期)2022-07-06甲状腺癌“低位领”式与“L”型切口淋巴结清扫术的比较承德医学院学报(2022年2期)2022-05-23甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移的术前高频超声诊断分析中国典型病例大全(2022年12期)2022-05-13喉前淋巴结与甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移的相关性研究天津医科大学学报(2021年4期)2021-08-21关于路的k-方图的邻点可区别-边全染色和第一类弱全染色安阳师范学院学报(2021年2期)2021-04-21分化型甲状腺癌切除术后多发骨转移一例国际放射医学核医学杂志(2021年10期)2021-02-28分化型甲状腺癌肺转移的研究进展国际放射医学核医学杂志(2021年10期)2021-02-28甲状腺乳头状癌右侧喉返神经深层淋巴结转移率及影响因素现代临床医学(2021年1期)2021-01-26Mir-222-3p 对中西医结合治疗甲状腺癌效果的影响医学概论(2021年18期)2021-01-21中老年人更需警惕鼻内翻性乳头状瘤保健与生活(2019年11期)2019-07-31
