医院生物技术科技项目可行性报告

项目名称：同时检测ToRCH-IgM抗体免疫层析试纸条的研制
及产业化研究
领    域：生物技术
起止时间：2007、01 — 2009、12
**区科学技术局
二OO七年三月 

一、立项的背景和意义
ToRCH是指可导致先天性宫内感染及围产期感染而引起围产儿畸形的病原体。首先由Nahmias于1971年采用一组病原微生物的英文名称首字母缩写而成，其中T（Toxoplasma gondii,Tox）是弓形体、R(Rubella Virus,RV)是风疹病毒、C(Cytomegalovirus,CMV)是巨细胞病毒、H(Herpes simplex Virus,HSV)是单纯疱疹病毒，O（Others）是EB病毒，HIV病毒和人细小病毒B19等。这些病原体均可引起胎儿的早产、流产、宫内发育迟滞、畸形、死胎和新生儿死亡等。
胎儿ToRCH的感染致畸与母体的感染有密切关系[1-5]。弓形体病为人畜共患寄生虫病，孕妇急性感染，约30～40%可传给胎儿造成各类先天畸形；
妊娠第一个月时风疹感染致胎儿先天畸形的发病率达50%，第二个月为30%、第三个月为20%、第四个月5%，风疹是引起婴儿畸形的主要原因；
据报道，日本每年可出生先天性CMV感染小儿5000例，其中有症状者达400～500例，因而把预防母体CMV初感染作为侧重点，对不具有CMV特异抗体的育龄妇女进行医学干预；
HSV分Ⅰ、Ⅱ两个血清型，胎儿及新生儿的感染多是经胎盘和产道垂直传播所致,新生儿HSV感染的发病率约1/3500～1/5000活产儿，多数由Ⅱ型引起。
以上说明孕妇ToRCH感染是不良妊娠结局的重要原因，对优生优育与人口素质构成很大的威胁，因此对孕期进行ToRCH筛查是十分必要的。经过大量的研究，人们发现孕期ToRCH感染相当普遍（约90%），但只有近期或活动性感染才会危及胎儿，引起胎儿畸形等不良后果。ToRCH特异性IgM是近期和活动性感染指标。

目前临床上检测ToRCH-IgM抗体常用的是ELISA法，其操作程序比较复杂，检测时间较长，不适应孕妇感染的快速诊断和怀孕人群的筛查。而我们拟研制的“同时检测ToRCH-IgM抗体的胶体金快速检测免疫层析试纸条”，只需一次加样（加血清标本）操作就可鉴定出是ToRCH中何种病原体近期感染，检测方法快捷、不需要特殊仪器，大大方便了临床检测和筛查工作，尤其适合于基层计划生育服务站和妇保院检测使用。
本项目组从2006年已开始进行“同时检测TORCH-IgM抗体免疫层析试纸条”的前期研究工作，经过一年的试验摸索，取得了阶段性的成果，积累了一定的工作经验，对拟要开展的“同时检测ToRCH-IgM抗体免疫层析试纸条的研制和产业化研究”项目成功打下了坚实的基础。
“同时检测ToRCH-IgM免疫层析试纸条”研制技术来源是引进消化吸收再创新的自有技术，是独立研制、并使之能产业化的项目。
本项目是利用本公司有较强推广和销售优势和本地区科研单位仪器设备先进、科研技术力量雄厚优势相联合，实现研、产、销一体化。
我国每年大约有1700万人口出生，政府和家庭对优生优育都非常重视，本项目产品，有着巨大市场前景，预期将产生良好的社会经济效益，对提高出生人口素质、减少出生缺陷和残疾有重要的意义。
参考文献
[1] 宋志琴,吕滨江,张爱玲. 孕妇TORCH感染对胎儿的影响[J].中国优生与遗传杂志2002,10(3):72-73.
[2] 何友雄，吕元聪. ToRCH母婴传播的研究进展[J].预防医学情报杂志,1998,14(1)27-30.
[3] 周吉海，谭季春. 日本TORCH感染研究近况[J].日本医学介绍2002，23(8)：377 - 379.
[4] Cullen A, Brown S,Cafferkey M,et al.Current use of the TORCH screen in the diagnosis of congenital infection[J].J Infect, 1998,36(2):185-188
[5] Newton ER. Diagnosis of perinatal TORCH infections[J]. Clin obstet gynecol.1999，42（1）：59-70
二、国内外现状和发展趋势
目前诊断ToRCH感染的方法主要有下列三种：1、病原体的培养分离，该方法准确性高，但由于操作复杂、费时较长，即使改良的方法也需要16-24小时检测时间，现在很少在临床诊断中应用。2、聚合酶链式反应（PCR），该方法灵敏度高、快速，可直接检测病原体，但对实验室和试剂的要求比较高，否则结果十分不可靠。3、酶联免疫法（ELISA）测定血清抗体。这是目前医院和计划生育部门普遍开展的检测ToRCH感染的方法，其主要测定血清中抗TORCH病原体的特异性抗体IgG和IgM，如果IgM阳性，表示孕妇近期有ToRCH感染（或称原发性感染），有引起胎儿畸形的可能，如果IgG阳性，表示过去有过ToRCH感染，对胎儿的影响不大。ELISA法试验操作除了需要把结合标记物与自由标记物分离而进行两次十遍洗涤步骤外，还需要三步加样（一步加血清标本和两步加诊断试剂），两步温育操作，检测比较繁琐，检测时间比较长，不能满足临床快速检测的需求，也不适应对人群的筛查。
免疫层析技术是在ELISA技术的基础上发展起来的一种快速免疫分析技术，它省去了繁琐的加样、操作简单、快速。其原理是借助毛细管作用，样品在条状纤维制成的膜上游动，其中的待测物与膜上一定区域的配体结合，通过着色标记物，短时间内便可得到直观的结果。
1990年Beggs等[6]应用胶体金为标记物建立了免疫层析试验，检测人尿和血清中绒毛膜促性腺激素（HCG）。它是将含有胶体金-抗α-HCG单抗络合物的玻璃纤维垫贴于硝酸膜的一端，中间是用抗体包被成“+”字型的检测区，其竖线包被的是抗-β-HCG多抗的F(ab)2片段，横线是抗鼠IgG多抗。另一端是含pH指示剂的终点指示区。加样后，玻璃纤维垫上的络合物与样品中的HCG结合，复合物在毛细管作用下向上游动，在检测区与抗体结合形成“+”号，如无HCG，络合物只与横线上的多抗结合成“-”号。当溶液游动到另一端时，指示剂变色，表示试验结束，可以读取结果。1991年Horton等[7]将金标免疫层析试验进行技术改进检测鼠IgG，将固定有羊抗鼠IgG的膜进行封闭并把胶体金标记的羊抗鼠IgG加于保护剂处理过的一端，在该端加样品进行层析。1999年Arao等[8]用三种材料来制作层析试纸条检测尿中乳铁蛋白，它是先将抗乳铁蛋白抗体和兔抗鼠IgG（对照线）固定在APC膜上，干燥后用蛋白封闭，胶体金标记的另一鼠抗乳铁蛋白抗体点在玻璃纤维膜的一端，用醋酸膜作吸水纸，各膜依一定顺序贴于聚苯乙烯上，检测时将样本加在玻璃纤维膜金标抗体的上游。10min后即可观察结果。2000年侯惠仁等[9] 以复合型层析材料为固相，用胶体金标记AFP McAb A14C11，固相包被AFP McAb A4A14，采用双抗体夹心免疫层析技术，研制出AFP免疫层析测试条,敏感度为10 ng/ml。2004年江静等[10] 研制出的免疫层析测试条，检测尿液中的甲基苯丙胺，敏感度可达1ng/ml。
近年来胶体金免疫层析技术作为一种免疫类新技术，发展十分迅速，在生物医学各研究领域特别是在医学检验中得到了日益广泛的应用，现在，国内外销售的金标免疫层析试验的成品多达几十种，如检测感染性疾病抗原（HBsAg、HbeAg、疟原虫抗原、大肠埃希菌抗原等），检测抗体（TB-Ab、Hp-Ab、HBsAb、HIV-Ab、抗登革热抗体等），检测蛋白质（AFP、癌胚抗原、肌红蛋白、肌钙蛋白、尿微量白蛋白、粪便血红蛋白等），检测激素（hCG，LH 、促卵泡生成素、促甲状腺激素），检测药物（毒品类，如吗啡、可卡因、鸦片、大麻、安非他命及摇头丸等）。随着免疫分析固相技术的发展和生化试剂制备技术的进步，免疫层析法将是诊断试剂的发展方向之一。
实现检测多元化是免疫层析试验的一个重要发展方向，一次检测可同时得到一组结果，这对于检测某些具有联检意义的物质具有很大的应用价值，如HBsAg、抗HIV抗体以及抗HCV抗体的检测组合对献血员检查更为方便。Buechler等[11]采用一膜包被多条抗体带（包括阳性对照和阴性对照）的方法，同时检测尿中的七种危禁药物。
医院，尤其是计划生育服务部门筛查孕早期或孕前妇女是否有ToRCH急性感染，往往一份血清标本需要同时检测抗弓形体、抗巨细胞病毒、抗风疹病毒和抗单纯疱疹病毒II 型IgM抗体四项指标。我们拟研制的试纸条就是为此需求而设计的，我们先把强抗原性的Tox、RV、CMV、HSV-II型四种抗原同时包被在硝酸纤维膜上，然后再把已处理好的四种材料（样品垫、着金结合垫、固化的硝纤膜、吸收垫）按一定顺序贴于聚苯乙烯上，组装成试纸条，检测时把人血清加在加样区（样品垫）后，放置一段时间，用肉眼观察就可以鉴定出是否有或是哪种ToRCH病原体急性感染。操作非常简便，无需多次加样和用多个试剂盒检测，在围产期检查中具有很大的应用价值。
本项目组对“同时检测TORCH-IgM抗体免疫层析试纸条”已进行了为期一年的试验摸索，已在胶体金的制备、胶体金标记抗体的制备、试纸条的装配和检测等方面做了大量的基础性工作，取得了阶段性成果。
参考文献
[6] Beggs M,Novotny M,Sampedro S,et al. A self-performing chromatography immunoassay for the quanlitative determination of HCG in urine and serum [J]. Clin Chem,1990,36(6):1084-1085
[7] Horton J, Swinbume S,Sullivan M. A novel,rapid,single-step immunochromatographic procedure for the detection of mouse immunoglobulin[J]. J Immunol Method,1991,140:131-134.
[8] Arao S, Matsuura S,Nonomura M,et al.Measurement of urinary lactoferrin as a marker of urinary tract infection[J].Biotech Bioengin,1999,62(2):145-154.
[9] 侯惠仁，吴冯波，陈键，等. AFP免疫层析测试条的研制[J].同位素2000，13（3）：142-146.
[10] 江静,刘一兵,周棱，等. 甲基苯丙胺免疫层析测试条的研制[J].同位素 2004,17(2): 79-83.
[11] Buechler KF,Moi S,Noar B,et al.Simultaneous denection of seven drugs of abuse by the TriageTM panel for drugs of abuse.Clin Chem,1992,38(9)：1678-1684.
三、现有研究基础、特色和优势
（一）研究基础
1、本项目组有在ToRCH诊断试剂研究和开发方面具有丰富经验的研究人员。其中项目申请人有二十多年试剂研发和产业化经历，产品化的品种有早早孕、癌胚抗原、甲胎蛋白酶联试剂；
项目组第二位成员曾在山东省科技推广项目《TORCH系列ＥLISＡ试剂盒推广应用》中,独立承担试剂制备和质量控制工作，对ToRCH抗原及制备这类试剂积累了丰富的经验。课题组第三位成员具有非常强的科研能力，试验技术水平高并有产业化的实践经验，可以在技术指导、人员调配和工作时间上给予全力的支持。课题组第四位、第五位人员在诊断试剂方面具有较强的试验动手能力，多年来大家在工作上能默契配合，可以保证项目的顺利进行。
2、“同时检测TORCH-IgM抗体免疫层析试纸条”研制方面,本课题组已在胶体金的制备，见图1(1a、1b)；
胶体金标记抗体的制备、纯化及其标记质量鉴定（见图2）；
试纸条的装配（见图3）等方面进行了一系列的初步研究，本研究拟在此工作的基础上进行深入的研究，为本试纸条产品化打下坚实的基础。
3、与本单位联合完成项目的科研单位，拥有固定资产2200万元,仪器齐全，设备先进，技术力量雄厚，可满足本研究项目所需要的各种条件。
 （二）项目创新点
1、与传统的免疫层析试纸条相比，操作更加简便，一次加样，即可知是否有ToRCH四种病原体急性感染。
2、反应结果观察更为直观。
3、反应速度快，5分钟内即可观察结果。
4、血清标本用量少。
（三）项目在人才、资源和产业方面的特色和优势
1、本单位是一家以销售诊断试剂和医疗器械为主企业，在全国尤其在山东省已建立销售网络，2005年11月与一家有多年研发诊断试剂的科研单位签订了产品合作研发计划，并成立了科研项目组，产品的研发已经启动。
2、本项目组主要成员有多年研制和推广诊断试剂的工作经验，有科研项目产品化的经历，并且已经形成了一个研究团队，本试纸条容易形成产品。
3、目前医院妇产科和计划生育部门都要开展ToRCH方面的优生优育检测，本试纸条将会有非常好的应用前景。
4、医院妇产科和省市计划生育部门对育龄妇女进行ToRCH方面的优生优育检测，是对Tox、CMV、RV、HSV四种病原体感染的检测，本试纸条具有一次加样，即可知是否有这四种病原体急性感染，使用非常简便。检测时不需其它任何仪器设备，用肉眼即可观察结果，用户容易接受。
四、应用或产业化前景、市场需求。
1、本项目是研制面向临床的优生优育诊断试剂。并且本项目组主要成员有独立承担ToRCH诊断试剂（ELISA法）的研制和推广应用的工作经历；
在检测ToRCH-IgM免疫层析条制备方面本项目组已做了大量的前期工作，并且取得了一定的成果，本项目容易产业化。
   2、我国为人口大国，实行一对夫妇生一个孩子，优生优育工作非常重要。现在我国医疗及计划生育服务部门基本上都要开展早期或孕前ToRCH抗体检测工作，随着国家优生优育工作的深入进行，人们会更加重视对ToRCH感染的检测及预防。根据《中国妇女发展纲要》（2001-2010）和《中国儿童发展纲要（2001-2010）》要求，国家卫生部于2002年7月出台了《中国提高出生人口素质、减少出生缺陷和残疾行动计划（2002-2010）》,国家人口和计划生育委员会于2006年12月颁布了《全国“十一五”人口和计划生育事业发展规划》，其中都明确提出了加强产前筛选及诊断。每年我国大约有1700万人口出生，故诊断ToRCH感染的本试纸条试剂有广阔的市场应用前景。                       .
3、本试纸条产业化后，除销售本产品每年可带来可观的经济效益外，还可带动本地区相关产业如医疗器械、药品和其他试剂的发展。
五、研究内容与预期目标
（一）预期目标
  1、建立同时检测ToRCH-IgM抗体免疫层析试纸条制备技术；

  2、建立适合生产用的免疫层析试纸条制备技术。
   3、生产1000人份试纸条，在临床进行实际应用检测。
 4、申报发明专利1项。
（二）研究内容
1、建立制备15-50nm之间不同粒径胶体金颗粒技术；

     2、建立制备胶体金标记抗体技术；

   3、建立同时检测ToRCH-IgM抗体免疫层析试纸条制备工艺技术；

 4、评价同时检测ToRCH-IgM抗体免疫层析试纸条质量。
 5、生产一定数量试纸条，在临床进行实际应用检测。
六、研究方案、技术路线、组织方式与课题分解
(一) 研究方案
1、制备胶体金颗粒：制备15-50nm之间不同粒径胶体金颗粒，在透射电镜下观察其形态、大小，来鉴定胶体金制备质量。
  2、制备胶体金标记物
   （1）研究不同浓度的羊抗人IgM抗体与胶体金标记后，对试验灵敏度影响，选择抗体最佳标记浓度；

（2）研究不同大小胶体金粒径标记羊抗人IgM抗体，对试验验灵敏度影响，选择最佳金颗粒粒径；

   （3）研究不同pH值环境对胶体金标记羊抗人IgM抗体的影响；

（4）确定胶体金标记物纯化条件。
 3、免疫层析试纸条制备工艺研究
   （1）筛选符合生产用的抗原、抗体及敷料（样品垫、结合垫、吸收垫、硝酸纤维膜）；

   （2）选定抗原及抗体包被液；

（3）将抗原和抗体用包被液稀释到一定浓度后划到硝酸纤维膜上，并确定干燥条件；

   （4）将纯化的胶体金标记物涂在结合垫上，并确定干燥条件；

（5）确定包被抗原与金标记物浓度：用正交法确定CMV、RV、Tox、HSV-Ⅱ型四种抗原、抗羊IgG（作为阳性对照线）在硝酸纤维膜最佳包被浓度和胶体金标记物涂在结合垫浓度；
确定四种抗原固定在硝酸纤维膜具体位置；

本试验先做单项病原体抗原包被试纸条，试验成熟后再做四项病原体抗原同时包被；

（6）试纸条组装条件优化：样品垫、着金结合垫、包被有抗原的硝酸纤维膜、吸收垫，首尾相互衔接，优化衔接条件，按顺序固定于不干胶底板上；

（7）用切割机按一定规格切成条，组装试纸条；

（8）确定试纸条使用方法。
4、同时检测ToRCH-IgM抗体免疫层析试纸条质量评价
（1）灵敏度、特异性、精密度、稳定性评价。
（2）抗特异性IgG抗体、类风湿因子干扰实验评价。
（3）用临床检测出的ToRCH-IgM阴性、阳性标本验证本试纸条准确性、灵敏性。
5、生产1000人份的试纸条，在临床进行实际应用检测，验证其特异性、灵敏性和稳定性等。
（二）技术路线
  技术路线总结如下图:

                           技术路线框图
(三）关键技术
1、建立制备胶体金、胶体金标记物技术。
2、建立制备同时检测ToRCH-IgM抗体免疫层析试纸条工艺技术。
（四）主要技术指标
1、胶体金质量鉴定：透射电镜下观察胶体金颗粒应均匀一致，大小基本相等，形态一致。
2、试纸条质量评价：
 ① 稳定性指标：试纸条37℃存放10天（相当于室温放置18个月），与4℃比较，灵敏度变化率<15% 。
 ② 精密度指标：阳性标本各一份，连续检测10次，变异系数<15%。
 ③ 特异性指标：抗特异性IgG抗体和类风湿因子干扰试验，结果基本无影响。
     ④ 临床检测出的ToRCH-IgM阴性和阳性标本用本试纸条检测，两法阴阳性符合率、灵敏性基本一致。
（五）组织方式与课题分解
   本项目由两家共同承担，利用本单位有较强临床诊断试剂推广和销售优势和科研单位仪器设备先进、技术力量雄厚优势联合完成本项目。本单位主要负责产品推广应用及参与项目总体实施情况，科研单位负责该项目的研制和推广技术方面工作。
七、年度计划内容
1、2007年1月 — 2007年12月     
（1）抗原抗体、敷料及相关试剂的先期筛选和购买。
（2）制备胶体金、胶体金标记物及其条件优化，确定胶体金标记物的纯化条件，用透射电镜进行质量鉴定。
（3）选择最佳胶体金粒径标记抗人IgM抗体。
（4）对购买的敷料和制备的胶体金标记物进行预实验。
（5）收集临床ToRCH-IgM阳性、阴性标本和类风湿因子阳性标本。
2、2008年1月 — 2008年12月     
（1）进行免疫层析试纸条制备工艺研究。
（2）分析试验结果进一步改进和调整胶体金、免疫金制备条件以及筛选出并购买符合生产用的抗原、抗体和敷料。
3、2009年1月 — 2009年12月     
（1）对研制的本试纸条进行质量评价。
（2）进一步完善前面的相关研究，使试纸条研制技术成熟化。
（3）生产1000人份的试纸条，在临床进行实际应用检测，验证其特异性、灵敏性和稳定性等。
（4）总结资料，申报专利，课题鉴定。
八、主要研究人员和单位简况及具备的条件
（一）主要研究人员情况
1、项目组第一位成员，所学专业为生物专业，从事专业为分子诊断学，本科学历，高级工程师。二十多年来一直从事诊断试剂研究和开发，是我国早期研制早早孕诊断试剂的研发人员之一，研制并使之产业化产品有早早孕（HCG）、甲胎蛋白、癌胚抗原酶联诊断试剂。发表论文20余篇。
2、项目组第二位成员，所学专业为临床检验专业，现从事分子诊断学专业，大专学历，副研究员。自1996年以来一直从事诊断试剂的研制和开发，为主承担的诊断试剂方面的课题七项。
其中①山东省科技攻关课题“艾滋病病毒、丙肝病毒抗体联检试剂的研制及应用研究”1999年10月获省科技进步三等奖（第3位）；
2003年12月“人类免疫缺陷病毒抗体、丙型肝炎病毒抗体联合检测试剂盒（酶联免疫法）”获国家食品药品监督管理局颁发的国家生物一类新药和生产批文（注册号：国药准字S20030094 ,新药证书编号：国药证字S20030070），2003年成功转让到深圳一家公司，转让费260万元，单位持有20%的股份。该成员在这个项目中承担了全部实验部分并指导转让厂家技术人员试验；
参与了转让厂家厂房GMP认证，并顺利通过了国家验收。
②在山东省科技推广计划项目“TORCH系列ELISA试剂盒推广应用”中，独立承担了研制和质量控质工作，该项目在山东省17个地市及湖南、安徽省部分地区得到推广应用，取得直接经济效益200万元以上。
③为主完成的山东省科委重大项目“系列新型生物芯片的研制”，2005年获山东省科技进步奖一等奖（第7位）
④“多重聚合酶链式反应试剂的研制及应用研究”项目2000年12月获山东省厅级科技成果一等奖（第2位）；

⑤近三年在国内核心期刊发表TORCH方面的论著5篇(均为第1作者)。2006年发表SCI论著1篇(影响系数2.362,第3作者).
3、项目组第三位成员，所学专业和从事专业为生化与分子生物学，博士，博士生导师，研究员，享受国务院政府特殊津贴。曾获卫生部科技进步二等奖一项、2005年获山东省科技进步一等奖一项（第1位）、山东省科技进步二等奖四项（都是第1位）、山东省科技进步三等奖五项（三项为第1位），获国家新药证书2项（名次是第1位和第2位），国家专利6项，发表学术论文110余篇，著作7部。
4、项目组第四位成员，所学专业为检验专业，从事专业为分子诊断学，硕士研究生，副研究员。曾获山东省科技进步一等奖一项，二等奖一项，三等奖两项（都为主要完成者），发表论文20余篇。
5、项目组第五位成员，所学专业和从事专业为生化与分子生物学，硕士研究生学历，实习研究员。发表论文4篇（第一作者）。
（二）单位研究开发业绩：
本单位曾有过研发早早孕（HCG）、甲胎蛋白、癌胚抗原等酶联诊断试剂经历。与本单位签订产品研发计划的科研单位自1997年成立以来，已获国家新药证书2项，其中①“人类免疫缺陷病毒抗体、丙肝病毒抗体联检试剂”2003年12月获国家生物I类新药证书和生产批文（注册号：国药准字S20030094 ,新药证书编号：国药证字S20030070）。并成功转让到深圳一家公司，转让费260万元，单位占20%的股份；
②“rhGM-CFS的研制” 1999年获国家Ⅱ类新药证书，已获技术转让费550万元，占合资企业股份的25%。③山东省科技推广计划项目“TORCH系列ELISA试剂盒推广应用”在山东省17个地市及湖南、安徽省部分地区得到推广应用，取得直接经济效益200万元以上。④国家科技部和山东省重点攻关项目“重组人成骨蛋白-1基因工程”目前正在进行中试研究，积极准备新药申报工作，研制具有自主知识产权的新药。
（三）单位简况和条件
与本单位联合研发本项目的科研单位是国家卫生部生物技术重点实验室，拥有固定科技人员26名，其中博士后3人，博士6人，高级专业职务人员12人。拥有固定资产2200万元,拥有真空冷冻干燥机、低温超速离心机、真空浓缩离心机、酶标仪、XDS-1B型倒置显微镜，数字影像分析系统和各种常用的仪器设备。另外还拥有电子显微镜，观察金颗粒，免疫金非常方便。整个实验研究用本单位仪器设备即可完成。
九、经费预算
(一）、项目总投资经费：
 
经费来源 金额（万元） 主要用途   
合计 100    
自筹资金 70 仪器设备购置费和维修费，试验外协费，人员劳务费，试验费   
上级部门拨款 10 人员劳务费；
试验费   
科技三项经费 20 试验费；
仪器设备购置费；
印刷费；
差旅费   
已完成投资 23 仪器设备购置费；
人员劳务费；
试验费 

(二)、科技三项经费：
 
项   目 金额(万元)   
合计: 20.00   
仪器设备购置费 1.50   
免疫层析试验敷料筛选与购置费 3.00   
ToRCH抗原、抗体筛选与购置费 9.50   
试剂及消耗品购置费 3.00   
资料印刷费 0.50   
学术会议及论文印刷费 1.50   
鉴定验收费 1.00