宜宾市冬春季禽流感监测结果分析
时间：2023-02-17 13:35:05 来源：柠檬阅读网 本文已影响 人 
□文/陈燕凌 王颖旺 江科 黄利娟 周凡 吴玉疆 金仕强
禽流感（AvianInfluenza）是由正粘病毒科流感病毒属A型流感病毒引起的以禽类为主的烈性传染病。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须报告的动物传染病，我国将其列为一类动物疫病。目前，禽流感病毒已广泛分布于世界各地，每一次严重的爆发不仅可造成严重的经济损失，而且对人类的生命健康也构成了威胁。部分禽流感也能感染人，人感染后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等，多数伴有严重的肺炎，严重者心、肾等多种脏器衰竭死亡。
冬春季是高致病性禽流感等重大动物疫病的高发季节，为及时掌握高致病性禽流感病毒在家禽中的感染、带毒、变异和流行情况，宜宾市开展“冬春季节高致病性禽流感监测专项行动”，为禽流感防控提供科学、及时、有效的监测预警预报，防范疫情风险。
（一）样品采集
采集11个活禽交易市场，4个家禽屠宰场，25个家禽养殖场（户）共40个监测点的禽泄殖腔和口腔双拭子212份；
采集全市21个家禽养殖场，5个活禽交易市场，4个家禽屠宰场的血清样品450份，-20℃保存在宜宾市动物疫病预防控制中心兽医实验室。
（二）病原学检测
采集的标本均进行禽流感核酸检测。检测试剂使用洛阳莱普生物信息科技有限公司生产的禽流感病毒通用型荧光RT-PCR检测试剂盒和病毒RNA提取试剂盒，均在有效期内。仪器为德国耶拿qTOWER3G实时荧光定量PCR仪。20微升反应体系，包括荧光定量PCR反应检测混合液10微升，引物混合液7微升，酶混合液0.5微升，RNA模板2.5微升。参数设置：反转录42℃5分钟；
预变性95℃10秒；
PCR95℃5秒，58℃40秒，循环40次；
在58℃采集荧光信号。
有效性判定：阳性对照：Ct值≤30，有明显指数增长；
阴性对照：Ct值＞38或无Ct值，线形为直线或轻微斜线，无明显指数增长期和平台期。
样本检测结果判定：Ct值≤35，有明显指数增长判为阳性；
检测结果Ct值在35～37范围，应对样本进行重复检测。如重复试验结果Ct值仍在35～37范围，有明显指数增长，则判为阳性，否则为阴性；
样品检测结果Ct值＞38或无Ct值为阴性。
（三）血清学检测
采集的标本进行禽流感H5亚型血凝及血凝抑制试验，检测试剂使用哈尔滨维科生物技术有限公司生产的H5Re-11/12抗原及阳性血清，均在有限期内。按照《高致病性禽流感诊断技术GB/T18936-2020》进行。
结果判定：当抗原对照孔完全凝集，且阴性对照血清抗体效价不高于1∶4（22或2log2），阳性对照血清抗体效价与已知效价误差不超过1个滴度时，试验方可成立。以完全抑制4HUA抗原的最高血清稀释倍数判为该血清的HI抗体效价。用于检测抗体，检测鸡血清时，HI抗体效价不高于1∶8判为阴性，不低于1∶16时判为阳性。
（一）核酸检测结果与分析
共检测样品212份，阳性对照阴性对照成立，其中有13份样品Ct值≤35，且有明显指数增长，判为阳性，如图1所示。
图1 图标本指数增长曲线图
根据结果分析，在采集的212份样品中，阳性样品13份，阳性率为6.1%；
在40个监测场点中，活禽交易市场11个，禽类屠宰场点4个，养殖场（户）25个，出现阳性的场点数为10个，其中包括7个活禽交易市场，3个活禽屠宰场，证明在活禽交易市场中禽流感病毒广泛存在，感染禽流感的风险极高（表1）。
表1 监测情况统计表
（二）血凝及血凝试验结果
共检测样品450份，阳性对照阴性对照成立，其中387份样品抗体效价不低于1∶16，判为阳性，其余样品抗体效价不高于1∶8判为阴性。
结果分析，在450份样品中，养殖场（户）样品数为359份，抗体阳性318份；
活禽交易市场样品数51份，抗体阳性样品数37份；
禽类屠宰场样品数40份，抗体阳性样品数32份。由此可见，养殖场（户）的禽流感抗体水平最好，抗体阳性率为88.57%，活禽交易市场的抗体水平最低，抗体阳性率为72.54%（表2）。
表2 血清学样品结果统计
（一）样品场所来源
农贸市场、家禽屠宰点检出病原学阳性样品，可能与农贸市场和屠宰场点禽只来源渠道广、家禽交易频繁、环境消杀不彻底有关；
与病原学阳性比较，养殖、交易、屠宰三个点位的血清学阳性均达到了70%以上，结合采样过程中未发现明显的高致病性禽流感症状，一方面说明了免疫后疫苗保护水平较高，现有疫苗免疫效果较好，一方面无法排除是否存在禽感染病原学阳性的情况。因此，从动物防疫角度考虑，需要进一步规范家禽屠宰环节和交易环节的检疫监管，认真执行日消、日清制度，规范禽类有序流动，降低生物安全风险。
（二）阳性样品的禽类
农贸市场、活禽交易市场检测出的病原学阳性样品主要是散养户拿到市场上售卖的鸡，禽类屠宰场的阳性样品是省内市外的肉鸭，且根据抗体监测结果，活禽交易市场和禽类屠宰场的抗体水平相对较低，也从侧面说明了散养户水禽的禽流感免疫不到位，存在了感染高致病性禽流感的风险。因此，要将高致病性禽流感的基础免疫工作落到实处，特别是加强对散养户和水禽的免疫，继续开展抗体水平监测，加强对水禽的抗体水平监测，对抗体监测不合格的要立即进行补免。
（三）禽流感流行情况
2021年宜宾市南溪区发生一起人感染禽流感H5N6亚型，2022年南充市西充县发生一起高致病性禽流感（H5N6亚型）疫情。宜宾市地处候鸟迁徙南线，每年春秋两季都会有候鸟路过宜宾，候鸟迁徙也可能带来高致病性禽流感病毒，因此还应加强对野鸟粪便的病原学监测，规范禽类饲养管理，切断疫病外来传播的风险。
（四）禽流感防控措施
一是要持续抓好春秋两季集中免疫，落实畜禽养殖者动物防疫主体责任，特别是中小散户集中免疫，保证免疫质量和数量；
二是要加强禽流感免疫效果监测评估，对禽流感抗体不达标的养殖户要及时进行补免；
三是加大对家禽屠宰环节和交易环节的检疫监管，落实日消和日清制度，同时加大对活禽交易市场、畜禽屠宰场、养殖场的动态监测；
四是要重视对野鸟或候鸟的监测，规范禽类实验管理，切断候鸟传播疫病的途径。切实做到人病兽防，关口前移，科学防控。
