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    紫阳绞股蓝主要成分分析及其功效说明

    时间:2020-12-23 08:03:07 来源:柠檬阅读网 本文已影响 柠檬阅读网手机站

    (西安市产品质量监督检验所,陕西 西安 710065)
    摘 要:文章介绍了通过高效液相色谱法与分光光度计法等多个检测方法,测定紫阳产绞股蓝的主要功效成分的过程,并将其与其他植物比较得出其具有独特的功效作用。
    关键词:绞股蓝;
    皂甙;
    硒
    中图分类号:R282.7  文献标识码:A  文章编号:1007—6921(2008)12—0037—02

    绞股蓝又名七叶胆、五叶参,自然生长于陕西南部,湖北西部山区,绞股蓝在古时民间已被广泛使用,把它作为“神奇”的“不老长寿药草”。明代称之为“神仙草”。绞股蓝其名始于1525年明嘉定四年朱棣所著《救荒本草》一书,中国药典亦称绞股蓝。

    现在查明,绞股蓝主要成分为绞股蓝皂甙(GP),皂甙、黄酮、多糖、氨基酸、微量元素。皂甙成分:目前已分得单体皂甙83种,均属达玛脂烷醇类结构,其中绞股蓝皂甙3、4、8 、X2分别与人参皂甙Rb1、Rd3、Rb、F2是同一物质,绞股蓝皂甙 1酶解,得人参皂甙K3,绞股蓝皂甙V-AH与人参皂甙Rg3相同,其余均可视为 原人参二醇及原人参三醇的异构体。氨基酸:共有18种氨基酸,其中有6种人体必需的氨基酸。微量元素:绞股蓝含有的各种常量元素和微量元素,人体所需的微量元素锰(Mm)、锌(Zn )、铁(Fe)等在绞股蓝中含量较高,陕西产地的绞股蓝中含有硒(Se),黄酮类化合物,多糖。经初步分析绞股蓝、叶中均含有果糖、葡萄糖、半乳糖和低聚糖。

    为进一步研究绞股蓝功效成分具体含量,笔者对市售紫阳县绞股蓝茶叶做了全面的成分分析,为使数据有参考性,特同时做一紫阳陕青茶叶作一对比,现将最主要功效成分分析方法陈述如下:
    1 绞股蓝皂甙含量测定
    1.1 试剂

    甲醇(色谱纯);
    水(重蒸水);
    绞股蓝皂甙标准品(纯度≥98%)。

    绞股蓝皂甙标准溶液的制备:精确称取绞股蓝皂甙标准品10mg,加流动相甲醇+水(55+45)溶解并移入100mL容量瓶中,定容至刻度。
    1.2 仪器设备

    高效液相色谱仪、附紫外检测器;

    色谱柱:C18(以十八烷基键合硅胶填料为填充剂)或具同等性能的色谱柱,150mm×6mm,5μm;
    超声波清洗器;

    C18净化富集柱:C18预柱装量0.5g,分配型;

    离心机:3 000r/min。
    1.3 色谱分离条件
    流动相:甲醇+水=55+45
    流速:1mL/min
    柱温:40℃
    检测波长:293nm
    灵敏度:0.016AUFS
    进样量:10μL
    1.4 分析步骤

    试样制备:将固体试样粉碎成粉末状,混匀。准确称取上述经处理后的试样1.00g于50mL容量瓶中,加检测用流动相30mL溶解,经超声振提5min加流动相定容50mL,离心沉淀,上清液经滤膜(0.45μm)过滤。

    测定步骤:分别精密吸取标准溶液和试样溶液10μL注入高效液相色谱仪,依上述色谱条件,以保留时间定性,用外标法计算试样中绞股蓝皂甙的含量。

    最终测得绞股蓝1#样品与2#样品皂甙含量为2.68,2.74,而茶叶的绞股蓝皂甙的含量为未检出。
    2 微量元素中硒含量的测定
    2.1 试剂和材料
       硫酸:优级纯
      混合酸:硝酸——硫酸——高氯酸(14+2+2)
      乙二胺四乙酸二钠(EDTA一2Na)溶液:0.1%
      盐酸羟胺溶液:10%
      氨水溶液(1+1)
      盐酸溶液(1+1)
      盐酸溶液:0.1mol/L
      环己烷:经测定无荧光杂质,有必要时重蒸馏后使用。
    甲酚红指示剂:称取0.1g甲酚红,加1滴50%氢氧化钠和10mL水溶解,并稀释到50mL。
    2,3一二氨基萘(DAN)溶液:在暗室中配制。称取0.1g DAN,加0.1 mol/L盐酸溶液100mL,振摇使其溶解。将溶液转入250mL分液漏斗中,加20mL环己烷,剧烈振摇5min,静置分层后,弃去环已烷相。再加入20mL环己烷,重复萃取三次,收集水相于100mL棕色容量瓶,用水定容并覆盖一层环己烷,储存于冰箱中,每次临用前再用20mL环己烷萃取一次。

    硒标准溶液:准确称取0.1000 g硒(纯度≥99.9%),加5 mL硝酸,温热使其溶解;
    加水稀释到100 mL,此溶液每毫升相当于100 pg硒。硒标准工作液:吸取10.0 mL硒标准溶液置于100 mL容量瓶,以0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度,混匀,依次稀释到每毫升相当于0.1 pg硒。
    2.2 仪器和设备
       荧光分光光度计
      凯氏烧瓶:250 mL
      分液漏斗:125 mL,250 mL
      电热恒温水浴锅
      控温电炉
      具塞三角烧瓶:100 mL
       具塞刻度试管:5 mL
      称取1.00 g样品置于250 mL凯氏烧瓶中,用少量水润湿样品,加入18 mL混合酸,在控温电炉上加热消化。应逐渐升高温度,消化至冒高氯酸白烟,保持1 min,此时溶液呈无色或浅黄色,即为消化终点(在消化过程中如出现炭化现象,需重新取样消化)。取下冷却,加20 mL水,继续加热至冒高氯酸白烟;
    取下稍冷,加l0 mL水,待冷却到室温,用20 mL~30 mL水将样液转入100 mL具塞三角烧瓶中,加0.19/6EDTA一2Na溶液2 mL。
      按样品操作步骤,同时做试剂空白及相应含量的硒标准。
      在上述消化液中加入2滴甲酚红指示剂,以氨水溶液(1+1)和盐酸溶液(1+1)调节至溶液呈微橙红色。然后,加10%盐酸羟胺溶液1 mL,放置2 min,以下步骤需在暗室内进行。各加入DAN溶液2 mL,摇匀,置沸水浴中加热5 min,取出,冷却到室温。全部溶液转入125 mL分液漏斗中,加入5 mL环己烷,振摇萃取2 min,静置分层,放出下层水相,弃去。将环己烷层从分液漏斗上部倒入5 mL具塞试管中,并用环己烷定容至刻度。
    2.3 测定

    荧光分光光度计测定条件如下:激发波长380 nm,发射波长523 nm,狭缝10 nm,1 cm测量池。分别测定样液、试剂空白液和硒标准液中4,5一苯并苤硒脑络合物的荧光强度,与标准对照定量。
    检测得结果1#样品与2#样品的硒含量分别为8.1μg/kg, 8.5μg/kg, 而茶叶的硒含量为10.6μg/kg。
    3 其他主要成分的检测方法均为标准方法,其均侄结果分别如下
    氨基酸含量,13.1%
    总黄酮(以芦丁计):     1.2%
    多糖:           0.80%
    总磷:           0.31%
    维生素B1:          135mg/kg
    维生素B2:          10.0mg/kg
    维生素C:                     1.30mg/kg
    钙(Ca):                     1280mg/kg
    铁(Fe):                    121mg/kg
    锌(Zn):                      0.0021%
    4 结论

    茶叶在微量元素和维生素范围的含量和绞股蓝含量差别不大,但在功效成分总黄酮与多糖远少于绞股蓝,由此可见,绞股蓝有丰富的功效物质使得其有多种保健药用价值,又由于地理环境的影响,紫阳的茶叶与绞股蓝均富硒,使其有独特的功效。绞股蓝各主要功效成分的作用如下:
    4.1 绞股蓝皂甙性能

    绞股蓝所含皂甙总数有人参的4倍之多,它具有人参的作用,还有人参所没有的作用——清热解毒,又无人参过量服用的副作用。
    4.2 黄酮类化合物

    在防治动脉粥样硬化方面有较好的疗效。
    4.3 绞股蓝多糖

    多糖具有复杂面又多方面的生物活性,许多植物多糖对提高机体免疫力、抗癌、抗放射等都有一定作用,在医药领域中越来越受到人们的重视。绞股蓝茎叶中含有多糖。
    4.4 绞股蓝磷脂

    磷脂类成分对维持生物膜结构的完整及功能,调整人体的生理机能有重要意义。它具有增强免疫功能,补血和促进粥样硬化斑消散,增强胰岛素、骨细胞和神经细胞功能等作用,溶血磷脂酰胆碱尚有抗癌作用。
    4.5 绞股蓝氨基酸

    业已公认蛋白质、氨基酸为构成机体的重要物质基础。绞股蓝中含有18种氨基酸,包括人体必需的氨基酸和药效氨基酸。
    4.6 无机元素

    绞股蓝含有23种以上元素。其中13种为人体必需微量元素:铁、锌锰、铬、铜、钼、钴、硒、镍、钒、锶、硅、硼等。同时还含有5种人体必需的常量元素:钙、磷、钾、钠、镁等。绞股蓝中具明显抗癌活性的元素有7种:硼、镁、锰、钼、硒、锌、铜等,这可能是绞股蓝抗多种癌症的重要原因之一,尤其是元素硒在抗癌、保护心血管、防衰老方面有较好的作用。
    [参考文献]
    [1] 赵昌琼.绞股蓝的功效说明[J].西南师范大学学报,2002,28(1):122~125.
    [2] 张明生.地理环境与植物微量组分关系的研究[J].中国农业科学,2005,25(1):13~16.
    [3] 中华人民共和国国家出入境检验检疫局发布进出口茶叶中硒的检验方法荧光光度法[S].SN/T 0926-2000.

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