GeneXpertMTB/RIF,对结核病的诊断价值及复治患者群体特征研究
时间：2023-04-25 08:25:04 来源：柠檬阅读网 本文已影响 人 
刘乃刚，高迎春
(1.宝应县人民医院检验科，江苏 宝应 225800；
2.宝应县疾病预防控制中心检验科，江苏 宝应 225800)
结核病（tuberculosis）是由于结核杆菌引起的一种慢性传染病，结核菌会对人体器官造成损伤，其中肺部最容易受到侵犯，故肺结核是结核病的主要类型[1]。相关研究显示[2，3]，结核病患者人群中，80%以上的患者存在肺部症状，由于呼吸道是结核病患者的主要传播方式，特别是随着近年来经济发展快速，环境污染严重，结核病发病率呈逐年上升趋势。因此，准确诊断、及时有效治疗是关键。目前，诊断结核病的方法较多，其中常规抗酸染色阳性率低，而培养耗时长，均不能满足临床对结核病早期诊断、治疗需求[4]。GeneXpertMTB/RIF 属于分子诊断技术，具有操作简单、耗时短的优势。但是对结核病的诊断效能尚无统一定论，其诊断价值还需要临床不断探究证实[5]。本研究结合2021 年6 月-2022 年1 月在宝应县人民医院诊治的126 例疑似结核病患者临床资料，研究GeneXpertMTB/RIF 对结核病的诊断价值及复治患者群体特征，为临床结核病诊断以及预防和控制复治提供一定的参考依据，现报道如下。
1.1 一般资料 选取2021 年6 月-2022 年1 月在宝应县人民医院诊治的126 例疑似结核病患者，其中男92 例，女34 例；
年龄17～78 岁，平均年龄（45.19±5.10）岁；
其中复治患者28 例。患者自愿参加本研究，并签署知情同意书。
1.2 纳入和排除标准 纳入标准：①均合并不同程度咳嗽、咳痰、痰中带血或咯血[6]；
②未接受免疫抑制剂治疗患者以及并发糖尿病患者；
③认知、交流正常。排除标准：①合并肝、肾、心、脑血管系统等严重疾病者；
②依从性较差，不能配合者；
③随访资料不完善者。
1.3 方法
1.3.1 痰涂片染色 采用接种环取痰液样本中干奶酪样坏死血块，制成厚涂片，并快速干燥固定，制定结束后将涂片用石碳酸复红溶液染色，下部火焰加热5 min，流水冲洗，然后用3%盐酸乙醇将红色图片脱色1 min，流水冲净，再用亚甲蓝溶液将厚涂片染色30 s[7]。制备完成后在油镜下观察，出现驼色细菌或染色片呈红色现象，提示体内细菌具有抗酸性，如果出现蓝色且驼色现象提示体内细菌呈非抗酸性[8]。
1.3.2 改良罗氏培养法 将痰液标本采用4%的氢氧化钠溶液进行处理，通过无菌操作的方法将标本在改良罗氏培养基斜面上进行接种，在37 ℃的条件下分别培养3 d 和7 d 后进行观察，然后再每周观察1次，对生长情况进行详细记录，直至培养出阳性结果；
如果60 d 后无生长，则判断为阴性[8，9]。
1.3.3 GeneXpertMTB/RIF 检测 在痰液标本中以1∶2比例加入处理液，然后放置于涡旋振荡器上涡旋15～30 s，然后室温孵育10 min，在涡旋震荡15～30 s，室温孵育5 min，待标本完全液化，加入样品盒。将样品盒放入由美国Cepheid 公司生产的GeneXpertMTB/RIF 核酸扩增仪中，2 h 后读取结果。探针循环阈值≤38 时表示样本为阳性,早、晚期阈值差值≤3.5 表示利福平敏感[10，11]。
1.4 观察指标 观察不同检测方法（痰涂片染色、改良罗氏培养法、GeneXpertMTB/RIF）对结核病诊断效能、分枝杆菌利福平药敏性以及复治患者群体特征。
1.4.1 诊断效能[12]灵敏度=真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）×100%；
特异度=真阴性例数/（真阴性例数+假阳性例数）×100%。
1.4.2 症状和体征评分[13]包括咳嗽、咳痰、咯血、胸痛、呼吸困难、乏力，依据严重程度分为无症状、轻度、中度、重度，依次记为0、1、2、3 分，评分越高症状越严重。
1.5 统计学方法 采用统计软件包SPSS 21.0 版本对本研究的数据进行统计学处理，采用（P＜0.05 说明差异有统计学意义。
2.1 不同检测方法阳性率比较 GeneXpertMTB/RIF检测阳性率高于痰涂片染色、改良罗氏培养法检测阳性率（P＜0.05），见表1。
表1 不同检测方法阳性率比较[（%）]
表1 不同检测方法阳性率比较[（%）]
注：与痰涂片染色、改良罗氏培养法比较，*P＜0.05
2.2 不同检测方法诊断效能比较 3 种方法联合检测敏感度均高于GeneXpertMTB/RIF、痰涂片染色、改良罗氏培养法（P＜0.05），特异度小于改良罗氏培养法、GeneXpertMTB/RIF、痰涂片染色（P＜0.05），且GeneXpertMTB/RIF 特异度小于改良罗氏培养法（P＜0.05），见表2。
表2 不同检测方法诊断效能比较（,%）
表2 不同检测方法诊断效能比较（,%）
注：与3 种方法联合比较，P＜0.05；
与痰涂片染色、GeneXpertMTB/RIF、3 种方法联合比较，**P＜0.05
2.3 GeneXpertMTB/RIF 检测方法与改良罗氏培养法结果一致性 GeneXpertMTB/RIF 检测利福平结核枝杆菌药敏结果与改良罗氏培养法结果一致性良好（Kappa=0.722，=0.001）。
2.4 复治患者单因素分析 复治患者单因素分析显示，不同地区、职业、结核病接触史、治疗前症状和体征评分、既往治疗次数、既往用药种类、既往用药不良反应比较，差异有统计学意义（P＜0.05），而不同年龄、性别比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。
表3 复治患者单因素分析（,%）
表3 复治患者单因素分析（,%）
2.5 多因素Logistic 回归分析复治患者独立危险因素 治疗前症状及体征评分≥6 分、既往治疗＞2 次、农村、农民是复治患者发生的独立危险因素（P＜0.05），见表4。
表4 多因素Logistic 回归分析复治患者独立危险因素
结核病传统痰涂片镜检和结核分枝杆菌培养在临床应用均具有一定的局限性[14，15]。本研究选择的GeneXpertMTB/RIF 技术是一种全新的体外诊断技术，可实现定量聚合酶链式反应（PCR）扩增和荧光扩增于一体，采用一次性试剂盒，可自动完成检测，相对可减少检测过程中的干扰因素，且检测时间仅为2 h，从理论基础上分析可满足早期结核病诊断和治疗需求[16，17]。基于以上优点，GeneXpertMTB/RIF技术可作为结核病诊断首选方式。但是目前关于GeneXpertMTB/RIF 对结核病诊断敏感度、特异度相关研究存在差异[18]。
本研究结果显示，GeneXpertMTB/RIF 检测阳性率高于痰涂片染色、改良罗氏培养法检测阳性率（＜0.05），与常规结核病检测方法比较，GeneXpertMTB/RIF 可提高检测阳性率，可对人群进行筛查，有效缩小筛查范围，确定高危人群，该结论与张玉等[19]的研究结果基本一致。同时研究结果显示，3 种方法联合检测敏感度均高于GeneXpertMTB/RIF、痰涂片染色、改良罗氏培养法（P＜0.05），特异度小于改良罗氏培养法、GeneXpertMTB/RIF、痰涂片染色（P＜0.05），且GeneXpertMTB/RIF 特异度小于改良罗氏培养法（P＜0.05），提示3 种方法比较GeneXpertMTB/RI 具有较高的诊断敏感度，但是改良罗氏培养法对诊断特异度极高，与涂阴结核临床诊断一致性良好。虽然3 种方法联合诊断可提高敏感度，但特异度却降低。因此，对于结核病患者，GeneXpertMTB/RI 检测方式是最佳的诊断方法，但是为了进一步提高诊断敏感度和特异度，可采用3 种检测方法联合，以获得更准确的诊断效果。GeneXpertMTB/RIF 检测利福平结核枝杆菌药敏结果与改良罗氏培养法结果一致性良好（Kappa=0.722，P＜0.05），该结论提示GeneXpertMTB/RI 检测和改良罗氏培养法药敏试验具有较高的一致性，可见该方法诊断结核病可获得良好的诊断效能，尤其是其与药敏试验较高一致性可为复治结核病患者治疗提供可靠的参考，并有利于减少耐药结核病的传播。此外，对复治患者进行单因素分析，发现不同地区、职业、结核病接触史、治疗前症状和体征评分、既往治疗次数、既往用药种类、既往用药不良反应比较，差异有统计学意义（P＜0.05），而不同年龄、性别比较，差异无统计学意义（P＞0.05），提示复治结核病患者具有一定的群体特点，与职业、所在地域、结核病接触史、治疗前症状评分、既往治疗次数和用药种类以及用药不良反应密切相关。分析认为可能与农村生活环境差，农民文化程度相对较低，对疾病相关预防知识了解及重视少，从而容易造成结核病感染和传播，从而增加再次感染的风险[20]。同时临床治疗前症状评分越高，病情越严重，且治疗次数、用药种类越多，耐药风险越高，从而增加健康人群的感染，提高复治率。多因素Logistic 回归分析，农村、农民治疗前症状及体征评分≥6 分、既往治疗＞2 次是复治患者发生的独立危险因素（p＜0.05），表明农村、农民、治疗前症状及体征评分≥6 分、既往治疗＞2 次是结核病复治患者高危人群。因此，加强对农村、农民结核病患者健康宣教，尤其对治疗症状评分较高患者，在治疗过程进行密切监测，从而有效控制以上风险因素，降低结核病复治发生率，提高临床结核病初始治愈率。
综上所述，GeneXpertMTB/RIF 对结核病具有较高的诊断价值，且可获得与改良罗氏培养法结果一致的利福平结核枝杆菌药敏结果。临床依据GeneXpertMTB/RIF 诊断结果，并结合结核病复治患者群体特征（农村、农民、治疗前症状及体征评分≥6分、既往治疗＞2 次），加强对高危群体监测和防控，从而减少结核病的复发和传播。
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