父母代肉种鸡免疫肠炎沙门菌活疫苗两次与三次的效果跟踪
时间：2023-01-19 19:35:12 来源：柠檬阅读网 本文已影响 人 
巩新民，祝永华，郭龙宗
（山东益生种畜禽股份有限公司，烟台 264680）
沙门菌是危害家禽养殖业的最重要细菌性病原之一，可引起禽类各种各样的急性和慢性疾病[1]。其具有复杂的抗原结构，一般包括三种抗原，它们分别是菌体抗原（O）、表面抗原（Vi）、鞭毛抗原（H），O抗原是每株沙门菌均含有的抗原成分。沙门菌是一种需氧及兼性厌氧菌，在普通琼脂培养基上培养20～24 h，生长良好，并形成圆形、中等大小、表面光滑、边缘整齐、无色半透明的单菌落，是革兰氏阴性菌、无荚膜、无芽孢，除鸡白痢沙门菌、禽伤寒沙门菌外，其他都具有鞭毛可以运动，多数沙门菌具有菌毛结构，可吸附在宿主细胞表面[2]。
迄今为止，已发现2600多种血清型的沙门菌[3]。对家禽危害较大的血清型包括传统意义上的鸡白痢沙门菌和禽伤寒沙门菌，以及其他引起禽副伤寒的诸多沙门菌血清型。禽副伤寒沙门菌的感染非常普遍，是使各种幼禽遭受严重死亡损失的细菌性疾病之一，临床感染的血清型以肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌为主，也因为其是人类食物源性疾病病原而具有非常重要的公共卫生意义[4]，因而受到广泛关注。目前对于沙门菌病的主要防控措施有定期监测、药物预防、疫苗免疫及应用益生菌等，而免疫一直是所有疫病防控的基础策略。沙门菌的活疫苗和弱毒活疫苗已经在全世界应用，它们的效果已经通过攻毒实验得到验证，这将是今后家禽沙门菌病防控的必要手段[5]。
本研究通过对某大型白羽肉种鸡公司A、B两个规模化父母代肉种鸡场，前后各一个种鸡批次，分别采用两次和三次肠炎沙门菌活疫苗免疫的效果进行了跟踪对比，为种鸡场肠炎沙门菌活疫苗免疫程序的制定提供科学指导。
1.1 实验鸡群 山东某大型白羽肉种鸡公司规模化父母代种鸡场，A、B两场前后饲养的4个批次，分别为A场的170511/20批和190706批、B场的201705批和201812批，每批饲养量约20万套。同一场内分别先后饲养两个批次，采样2次和3次良种免疫程序。饲养期间场区管理人员、硬件条件、操作流程相同。
1.2 主要试剂 鸡白痢-伤寒多价染色平板凝集试验抗原及阴性和阳性血清均购自北京中海生物科技有限公司；
用于微生物分离鉴定的培养液和培养基等均购自青岛海博生物技术有限公司；
沙门菌属O多价诊断血清A-F购自宁波天润生物药业有限公司。
1.3 免疫疫苗 鸡肠炎沙门菌病活疫苗（AviPro®Salmonella Vac E），2000羽份/瓶，德国罗曼动物保健有限公司生产。
1.4 净化药物 药物a，阿莫西林，山东华辰制药有限公司安力素；
药物b，多西环素，郑州福源动物药业有限公司呼栏；
药物c，磺胺，天津瑞普生物技术股份有限公司速可能；
药物d，氟苯尼考山东华辰制药有限公司福可欣。
1.5 免疫程序 同一场饲养的前后2批鸡肠炎沙门菌活疫苗免疫分别采用两次和三次方式，采用两次免疫的批次是在6周龄和16周龄饮水免疫，每只鸡剂量为羽份；
采用三次免疫的批次是在1日龄、6周龄和16周龄饮水免疫，每只鸡剂量为1羽份。详见表1。
表1 免疫程序Table 1 Immunization procedures
1.6 样品采集与处理 用鸡白痢-伤寒平板凝集试验对种鸡血清跟踪监测，每次采集数量为鸡群饲养量的1%。按照NY/T 536-2002《鸡伤寒和鸡白痢诊断技术》[6]方法执行，检测出的阳性血清用生理盐水依次做4倍和8倍稀释，再进行平板凝集，观察结果，记录不同阳性率。种鸡所产种蛋孵化后的毛蛋及雏鸡从卵黄囊进行沙门菌的分离与鉴定，每次至少100只/枚。分离鉴定方法，参照GB4789.4-2010《食品安全国家标准-食品微生物学检验 沙门氏菌检验》[7]、《NY/T 536-2017鸡伤寒和鸡白痢诊断技术》[8]方法执行，分离出的疑似沙门菌，通过生化实验、单因子血清凝集实验、PCR方法进行鉴定。
2.1 血清鸡白痢-伤寒平板凝集结果 A场两次免疫批次鸡血清鸡白痢-伤寒平板凝集阳性率全程保持为3%～17%，血清做4倍和8倍稀释后的平板凝集阳性率显示，在产蛋后期有明显波动，但比例也较低。A场三次免疫批次血清鸡白痢-伤寒平板凝集阳性率除25周和54周超过10%以外，其他周龄均在8%以下，血清做4倍和8倍稀释后的平板凝集结果均为阴性。B场两次免疫批次鸡血清鸡白痢-伤寒平板凝集阳性率全程保持为10%～30%，血清做4倍和8倍稀释后平板凝集检测结果显示产蛋高峰阶段和产蛋后期有明显波动。B场三次免疫批次血清鸡白痢-伤寒平板凝集阳性率全程保持在10%以下，血清4倍和8倍稀释后均为阴性（表3）。
表2 采样周龄Table 2 Sampling week age
表3 血清鸡白痢-伤寒平板凝集结果Table 3 Results of serum plate agglutination of pullorum and typhoid
2.2 沙门菌分离与血清型鉴定结果 A场两次免疫批次45周龄后所产毛蛋基本每次都有沙门菌分离出，但雏鸡中未分离出沙门菌，经生化、单因子血清凝集、PCR鉴定，毛蛋中分离菌株均为肠炎沙门菌。A场三次免疫批次毛蛋和雏鸡中均未分离到沙门菌。B场两次免疫批次35周龄后所产毛蛋每次都有沙门菌分离出，在49周的雏鸡中也分离出沙门菌，经生化、单因子血清凝集、PCR鉴定，毛蛋和雏鸡中分离到的均为肠炎沙门菌。B场三次免疫批次毛蛋和雏鸡中均未分离到沙门菌（表4）。
表4 毛蛋与健康雏鸡的沙门氏菌分离结果Table 4 Results of salmonella isolation from wool eggs and healthy chicks
2.3 开产后抗生素治疗费用的统计 开产后根据鸡群健康状况决定是否使用抗生素治疗，以B场统计数据为例。B场两次免疫批次共使用8次抗生素，总药费为2.4元/只，B场三次免疫批次共使用两次抗生素，总药费为0.3元/只，比两次免疫批次节约药费2.1元/只。其中两次免疫批次专门针对治疗沙门氏菌病的C药共使用4次，共2元/只（表5）。
表5 开产后抗生素治疗费用的统计Table 5 Statistics of postpartum antibiotic treatment costs
鸡白痢-伤寒平板凝集试验受抗原试剂批次稳定性、敏感性、血清质量变化及其他杂菌感染、鸡群细菌性灭活苗免疫等多重因素的干扰，其检测结果易出现假阳性[9]，日常检测中出现的阳性，不能充分、准确说明鸡群的感染状况。ELISA方法更加敏感和可靠，但因其费用过高，不适于临床大规模样品的常规监测。郭龙宗等[10]发现血清8倍稀释后的阳性与ELISA检测数据之间具有较强的对应性，血清8倍稀释后鸡白痢-伤寒沙门菌平板凝集阳性率可有效评估临床沙门菌野毒感染的状态。
沙门菌在毛蛋中的分离率远高于雏鸡，与沙门菌在种蛋孵化过程中大量生长、增殖，落盘后交互污染有关，从而更容易被检出。毛蛋检测结果对于种鸡群是否感染沙门菌具有明显的病原学指示作用。
通过两个场，前后分别采用2次和3次免疫的4批鸡大群田间实验检测跟踪，可以发现，肠炎沙门菌2次活疫苗免疫批次，血清4、8倍稀释后平板凝集长期阴性或阴性周龄段为主，证明鸡群感染率不高，血清抽样检测时，难以检出；
同时毛蛋中沙门菌的分离率A场全程在13%以内，大部分周龄在5%以内，B场则全程控制在23%以内，毛蛋与雏鸡的沙门菌检出率与血清的鸡白痢-伤寒平板凝集试验结果，尤其是血清8倍稀释后的结果，并没有呈现全程的关联性（同时阳性或同时阴性），主要还是与鸡群的感染率低有关，毛蛋在孵化过程中存在沙门菌的增殖或相互污染，而更容易被检测出，同时肠炎沙门菌和鸡白痢、禽伤寒虽同属于D群且有相同的抗原位点，但相比自身菌体抗原的识别而言，还是要低一些。但在血清8倍稀释使用鸡白痢-伤寒平板凝集检测出现结果阳性时，鸡群的沙门菌的感染是可以确认的，并需对鸡群采取对应的控制措施。
2次疫苗免疫，配合药物净化作用，对鸡群的肠炎沙门氏菌感染能起到较好的控制作用。但相比而言，三次免疫批次，血清4、8倍稀释后平板凝集和毛蛋分离全程都为阴性，效果优于2次免疫批次，分析可能与1日龄免疫，而更早的建立免疫保护有关，控制了鸡群的早期感染，育雏期是雏鸡对沙门菌的最为易感阶段。
按照Kauffman-White规则，鸡白痢、禽伤寒和肠炎沙门菌被统一划分为D亚群，这主要基于其O抗原一致，并具有相同的1、9、12的抗原位点，也进而决定了属于同一亚群的沙门菌之间有较好的交叉保护，肠炎沙门菌活疫苗三次免疫可以有效抵抗禽伤寒的注射攻毒，显著减少鸡群死亡率，降低粪便中沙门菌排毒率和器官中沙门菌定植率[11]。白羽肉鸡种源目前主要为国外引种，已经实现鸡白痢、伤寒净化，在良好生物安全控制条件下，白羽肉鸡很少出现鸡白痢、禽伤寒的感染，本实验重点反应的是免疫肠炎沙门菌对鸡群感染肠炎沙门氏菌野毒的保护力。
通过血清8倍稀释平板凝集、毛蛋和雏鸡沙门菌分离结果，可以确定肠炎沙门菌活疫苗的三次免疫批次临床保护要好于两次免疫，开产后的药品投入相比两次免疫批次也明显减少，这说明肠炎沙门菌活疫苗三次免疫可对种鸡全生产周期肠炎沙门菌的感染提供良好保护，证明了三次免疫中尽早对鸡群进行首免占位的重要性。
沙门菌是一种胞内寄生病原微生物[12]，具有极强的适应能力，并且分布广泛，要彻底根除鸡群中的沙门菌是一项艰巨的工作，需要多环节的全面综合措施，包括疫苗免疫的特异性措施和场区生物安全、清洗消毒、有害生物控制在内的非特异性措施。肠炎沙门菌活疫苗可用于降低家禽肠炎沙门菌的感染压力，免疫三次肠炎沙门菌活疫苗的效果明显优于免疫两次，可对种鸡整个生产周期提供良好保护力。
猜你喜欢 沙门白痢种鸡 肉用种鸡育成阶段的养殖管理技术中国畜禽种业(2022年3期)2022-11-22种鸡转群注意这七点今日农业(2022年1期)2022-11-16肉种鸡的饲养管理措施吉林畜牧兽医(2022年4期)2022-11-16江西部分省级医院食源性疾病沙门菌监测与分子分型研究实用临床医学(2022年4期)2022-09-23一株鸡白痢沙门菌噬菌体的发酵及后处理工艺研究中国饲料(2022年5期)2022-04-26种鸡休产期该咋管理今日农业(2021年1期)2021-11-26鸡白痢对鸡生产性能影响的调查中国畜禽种业(2021年4期)2021-05-21仔猪白痢的诊断与防治策略猪业科学(2021年3期)2021-05-21耐三代头孢菌素沙门菌的耐药基因分析*临床检验杂志(2021年2期)2021-04-01探究禽病清散治疗鸡白痢效果农民致富之友(2019年4期)2019-03-13
