【潍坊地区哮喘儿童100例体外过敏原检测及临床意义】哮喘过敏原检测方法

时间：2019-05-21 03:34:30　来源：柠檬阅读网本文已影响人

　　支气管哮喘是一种慢性炎症性疾病，外源性非感染刺激是导致反复发作的一个重要原因，过敏原在儿童支气管哮喘的发生发展过程中起着举足轻重的作用，其病因较为复杂。为探讨潍坊地区支气管哮喘与常见各种过敏原的关系，为支气管哮喘的流行病学研究提供重要依据，并指导临床治疗和预防，2010年12月-2011年9月，本研究对在我院儿科门诊就诊及住院的100例支气管哮喘的患儿行吸入过敏原及食入过敏原筛查，并对过敏原进行分析，现报告如下：
　　1.对象与方法
　　1.1 对象：选择2010年12月-2011年9月在潍坊市人民医院儿科门诊及病房就诊的100例支气管哮喘的患儿为研究对象，哮喘患儿诊断符合儿童哮喘诊断标准［1］，且就诊前2周未使用过糖皮质激素及免疫调节剂。其中男孩55例，女孩45例，年龄在2岁-11岁之间。按年龄分组，7岁15例。
　　1.2 材料及器械：患儿血清、实验膜条、酶结合物（碱性磷酸酶标记的鼠抗人IgE抗体）、缓冲液、底物液（四座硝基苯胺蓝/5-溴-4-氯啶-3-吲哚-磷酸盐）、温育板（每板设8个温育槽）、结果判定模板、摇摆床、普通离心机。
　　1.3 检测方法：抽取患儿静脉血3ml，常温下自然凝固，采用普通离心机转速为3000r/min，离心3min后，取上层血清1ml，放置在2-8℃冰箱中保存24-72小时。采用欧蒙公司生产的特应性过敏原中国组合3体外检测试剂盒，按照使用说明，即采用体外定性的免疫印迹法，对145例患儿进行检测。
　　1.4 检测步骤：①预处理：将膜条放置于温育槽中，膜条上有编号的一面朝上，加入缓冲液1ml，于温室在摇摆床上温育5min，之后吸去温育槽中的液体；②血清温育：在温育槽中加入患者血清1ml，在摇摆床上室温温育60min；③吸去槽内液体，在摇摆床上用1.5ml缓冲液清洗膜条3次，每次5min；④酶结合物温育：在温育槽中加入1.0ml酶结合物，在摇摆床上室温温育60min；⑤清洗：吸去槽内液体，在摇摆床上用1.5ml缓冲液清洗膜条3次，每次5分钟；⑥底物温育：在温育槽中加入1.0ml底物液，与摇摆床上室温温育10分钟；⑦终止：吸去槽内液体，用蒸馏水清洗膜条3次，每次1min；⑧结果判定：将实验膜条放置在结果判定模板中，风干后判定结果。
　　1.5 判定标准：将膜条变应原着色结果同实验膜条上的指控指示带相比较，根据着色深浅，将结果分为：阳性、中度阳性、强阳性（阳性即具有临床意义）3种。
　　1.6 统计学处理：吸入组与食入性阳性率比较，采用x2检验。
　　2.结果
　　2.1 吸入性和食入性过敏原筛查实验，两者过敏原比较，（见表1）。
　　
　　吸入性过敏原食入性过敏原
　　阳性例数 62 36
　　阳性率 62% 36%
　　 2.2 吸入性过敏原和食入性过敏原阳性率分别比较，（见表2、3）。
　　2.3 不同年龄之间过敏原的比较，（见表4）。
　　3.讨论
　　哮喘是世界范围内最为常见的慢性呼吸道疾病，近几十年来哮喘患病率（尤其为儿童）显著上升，其中过敏性哮喘占很大比例，它的发病与接触过敏原有关［2］。患者多有明显过敏家族史，以儿童、青少年多见，常伴随其他过敏性疾病（湿疹、荨麻疹、过敏性鼻炎等）。有较明确过敏原接触史，明确引起哮喘发作的过敏原是解决哮喘治疗的关键。避免接触过敏原，就能有效避免哮喘发作。哮喘不是单一的疾病，绝大部分哮喘都有其特定的过敏原，找出过敏原并开始对因治疗是非常必要的。
　　3.1 过敏原分布随年龄、地区、气候不同而有差异。本地区引起哮喘的常见过敏原为粉尘螨、屋尘、法国梧桐花粉、鸡蛋、牛奶、淡水鱼虾类。随着年龄的增长，食入性过敏因素逐渐减少，而吸入性因素相对增加［3］。
　　3.2 根据本文调查，在日常生活中，哮喘患儿要尽量避免接触上述过敏原，预防措施为：①保持室内环境清洁、干燥，定时通风。②床垫和枕头用棉布外套，并经常对床上用品用60-100℃的水浸泡15-30min，不用地毯及皮毛制品。③室内避免放置花草。④擦拭门窗、家具尽量使用湿布，勿用干布及鸡毛掸子，以免扬起灰尘。
　　3.3 脱敏治疗。世界卫生组织推荐的针对过敏性疾病的理性化综合治疗方案：对症治疗+对因治疗。特异性免疫治疗是目前唯一针对过敏性疾病的对因治疗和对症治疗相辅相成。舌下特异性免疫治疗（SLIT）俗称舌下脱敏，是目前针对哮喘的疗法之一。SLIT是指由特定变应原诱发变应性疾病后，在一段时期内，让患儿由低剂量开始舌下含服变应原制剂，剂量逐渐增高，在一定时间内达到饱和剂量，并维持足够时间，使患儿的免疫系统耐受该变应原，当再次接触该变应原时，不再产生哮喘的症状或症状明显减轻。该方法适用于吸入性过敏原筛查阳性的患者，对于食入性过敏原，常用食入性过敏原过筛试验（fx5），fx5是一多价过敏原过筛试验，检测血浆或血清中是否曾在大豆、花生、牛奶、鸡蛋、小麦和鱼的特异性IgE抗体，检测灵敏度为89%，特异度为96%。
　　3.4 本次调查中究竟多少哮喘患儿发病明确系食物过敏所致，还是混合吸入过敏原有关，尚待进一步调查研究。小儿哮喘是一种过敏反应性疾病，作为过敏原在哮喘发病中具有关键作用，血清过敏原检测可作为哮喘儿童过敏原检测优先选用的方法之一，对临床哮喘患儿行过敏原检测，对于哮喘的病因诊断、治疗有积极意义。
　　参考文献
　　［1］全国儿童哮喘协组.儿童哮喘防治常规.中华儿科学杂志，1998，36（12）：747-750.
　　［2］刘恩梅，杨锡强.儿哮喘免疫学发病机制进展［J］.实用儿科临床杂志，2004，19（12）：1103.
　　［3］陈志育.儿童支气管哮喘的诊断与治疗.人民卫生出版社，2001：1-2.妊娠期补钙补铁
　　

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